如何克隆一个基因

网上有关“如何克隆一个基因”话题很是火热，小编也是针对如何克隆一个基因寻找了一些与之相关的一些信息进行分析，如果能碰巧解决你现在面临的问题，希望能够帮助到您。

1，到genebank里面找到几个近缘种的该基因序列，用序列软件（例如DNAMAN）比对一下，在相对保守的区域设计成对引物。

2，查阅一些文献，看要克隆的该基因在哪种组织里面表达量高。然后提取该组织或部位的RNA，反转录成CDNA。以CDNA作为模板进行PCR。

3，跑电泳，若有单一且大小接近的条带，切胶回收。

4，连接入质粒载体，送测序公司或自己测序，与近缘种内该基因比对后，便可确定该物种的该基因序列。

简单的说一下：

扩增目的基因，比如通过PCR的方法。

PCR扩增的序列可以通过酶切或者TOPO

TA的方法插入到载体质粒。

转染大肠杆菌

筛选阳性克隆一般常采用蓝白克隆方法，就是在载体上，序列的插入位置本来是一个完整编码β-gal这个酶的序列，如果不被破坏，产生的酶可以降解细菌培养盘上的底物，形成蓝色产物。如果有目的序列插入，这个酶就不能表达，形成的克隆就是白色的。

挑取阳性克隆，测序确认无变异和方向后，扩增质粒，提纯质粒。

（1）克隆的过程：先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞核者基因相同的动物。

（2）世界上第一个克隆出来的是北方豹蛙。1952年，罗伯特·布里格斯和托马斯·J·金成功地克隆了北方豹蛙。

（3）克隆技术的利：

培育优良畜种和生产实验动物；生产转基因动物；生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；复制濒危的动物物种，保存和传播动物物种资源，维持生态平衡。

克隆技术的弊端：

克隆技术导致的基因复制，会威胁基因多样性的保持，生物的演化将出现一个逆向的颠倒过程，即由复杂走向简单，这对生物的生存是极为不利的。克隆人是对自然生殖的替代和否定，打破了生物演进的自律性，带有典型的反自然性质。

扩展资料：

克隆也可以理解为复制、拷贝和翻倍（港澳台的意译），就是从原型中产生出同样的复制品，它的外表及遗传基因与原型完全相同，但大多行为思想不同。时至今日，“克隆”的含义已不仅仅是“无性繁殖”，凡是来自同一个祖先，无性繁殖出的一群个体，也叫“克隆”。

这种以单细胞培养出来的克隆动物，具有与单细胞供体完全相同的特征，是单细胞供体的“复制品”。由于克隆技术是无性生殖所以它并不是根据基因重组、基因突变、染色体变异等原理而发明的技术。虽然克隆很神奇，但是它诱人的地方也就是它最危险的地方。

百度百科-克隆

关于“如何克隆一个基因”这个话题的介绍，今天小编就给大家分享完了，如果对你有所帮助请保持对本站的关注！